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光学方法,如双光子荧光显微镜,宽视场照明不是一个实用的选择,因为现有的超快脉冲激光源不能提供足够的功率来同时激发整个视场。虽然超快激光不能照亮整个领域,但它们的能量足以同时照亮许多感兴趣的点。困难在于有效地将光线重新分配到只需要关注的区域。纯相位型SLM非常适合这项任务,它们可以动态地调整可用于成像和光刺激的活动波束的数量和位置。纯相位SLM通常使用向列相液晶矩阵,类似于多媒体投影仪中使用的矩阵。然而,与通过遮蔽特定像素来生成图像相比,纯相位SLM利用了光的波动特性,本质上就像计算机控制的衍射光栅,其中每个像素引入不同的相位延迟,而不是调制通过的光的强度。这反过来又导致了远场中像的产生,其方式 ...
第二代微型化双光子荧光显微镜FHIRM-TPM 2.0,其成像视野是第一代微型化显微镜的7.8倍,同时仪器还具备了三维成像能力,能有效获取小鼠在自由运动行为中大脑三维区域内上千个神经元清晰稳定的动态功能图像,并且实现了针对同一批神经元长达一个月的追踪记录。FHIRM - TPM 2.0成像视野拓宽至420 x420平方微米,微透镜工作距离延长至1 mm,实现无创成像;嵌入可拆卸快速轴向扫描模块,该扫描模块采用了Mirrorcle推出的MEMS扫描镜(MEMS扫描镜 、MEMS扫描镜开发套件),全部由单晶硅制成,也就是说这种设计使运动部件不包括任何易出故障的部件,例如,金属、聚合物、压电材料等。 ...
1436Hz纯相位空间光调制器在双光子/钙离子成像中的应用一、引言双光子成像是利用双光子吸收的一种成像技术,双光子吸收是指原子或分子在时间和空间上同时吸收两个光子而跃迁到高能级的现象。因此反应概率远小于一般的单光子吸收,它的几率正比于光强度的平方。神经元钙成像(calcium imaging)技术的原理就是借助钙离子浓度与神经元活动之间的严格对应关系,利用特殊的荧光染料或者蛋白质荧光探针(钙离子指示剂,calcium indicator),将神经元当中的钙离子浓度通过双光子吸收激发的荧光强度表征出来,从而达到检测神经元活动的目的。美国Meadowlark Optics公司专注于模拟寻找纯相位空 ...
成像技术中,双光子荧光显微镜(two-photon fluorescence microscopy, 2PFM)是对大脑这样的不透明组织进行成像的最流行技术,其微小的双光子吸收截面将荧光产生限制在显微镜物镜的聚焦体积内。为了对样品中的单个光学截面进行成像,2PFM在二维扫描激发焦点并记录每个位置的荧光信号,衍射极限焦点提供最亮的荧光信号以及最高的空间分辨率。然而,只有通过自适应光学(adaptive optics, AO)才能维持在体深度的高空间分辨率,自适应光学可以测量和校正成像光穿过光异质样品时在波前积累的光学像差。AO与2PFM相结合,将校正的相位模式应用于物镜后瞳平面(back pup ...
:小鼠肠道的双光子荧光显微镜图像用Sytox Green标记细胞核(洋红色),FITC滤波器;用Alexa Fluor 568 Phaloidin标记肌动蛋白丝(绿色),TRITC过滤器。两种荧光标记物同时被SCH激光器激发,用尼康的荧光滤片组过滤荧光。Image taken at ICFO-SLN the Super-Resolution Light Microscopy at ICFO- Institute of Photonics Sciences, Barcelona, Spain.综上所述,FYLA公司推出的新型、紧凑而强大的SCH全光纤飞秒激光器激光器,提供15fs的脉冲持续时间和 ...
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