中文：荧光显微镜；英文：fluorescence microscope

的干扰，常规荧光显微镜无法获得层析图像。三维结构光照明显微镜提高分辨率、获得层析图像的原理，就是利用特定结构的照明光来获得样品的高频信息，采用特定算法在横向和纵向上扩展样品频域信息的同时弥补凹陷带来的影响。饱和结构照明显微镜(SSIM)的原理法国OXXIUS多波长合束激光器应用在Nikon显微镜受激发射损耗显微（STED）在STED显微术中，有效荧光发光面积的减小是通过受激发射效应来实现的。一个典型的STED显微系统中需要两束照明光，其中一束为激发光，另外一束为损耗光。当激发光的照射使得其衍射斑范围内的荧光分子被激发，其中的 电子跃迁到激发态后，损耗光使得部分处于激发光斑外围的电子以受激发射的 ...

pe）要介绍荧光显微镜，我们需要先简单介绍一下荧光原理：在光的照射下，具有荧光特性的物质的电子在吸收能量后，可由低能级电子层跃迁到高能级电子层。高能态的电子是不稳定的，它会在极短的时间内（10-8s），以辐射光的形式释放能量后，回到原来的能态。这时发出的光即为荧光（fluorescence），其波长比激发光的波长要长，原理如图2-6所示。利用物质对光吸收的高度选择性，可制成各种滤片，吸收一定波长范围的光或允许特定波长的光通过，用来激发不同的荧光素，产生不同颜色的荧光。对于荧光的激发波长一般都在紫外和可见波段，而对于荧光的发射波段一般都在可见光波段观察荧光一般都采用落射荧光观察方式，就是激发光是 ...

大脑图像。在荧光显微镜中，当两个独立的光子被一种介质同时吸收时，就会发生双光子激发。这需要两个合适能量的光子在这样的介质上时间和空间上同时重合；通常来说这不需要非常大的激发光子通量，当然光子通量越大， 双光子同时被吸收的概率就越大。在TPEF显微镜中，更高的光子通量会带来更高的效率，从而带来图像质量和分辨率的提升。在TPEF显微镜中，双光子激发所需的大光子通量更多的是通过宽波段可调谐的钛宝石飞秒激光器实现的，激光器典型规格脉宽为100fs，重复频率约为80MHz，这可以给双光子显微镜带来非常高的峰值功率和大光子通量。然而，激光器较高的平均功率（在1~4瓦范围内）会由于激发波长的线性吸收引起的与 ...

术中，双光子荧光显微镜(two-photon fluorescence microscopy, 2PFM)是对大脑这样的不透明组织进行成像的最流行技术，其微小的双光子吸收截面将荧光产生限制在显微镜物镜的聚焦体积内。为了对样品中的单个光学截面进行成像，2PFM在二维扫描激发焦点并记录每个位置的荧光信号，衍射极限焦点提供最亮的荧光信号以及最高的空间分辨率。然而，只有通过自适应光学(adaptive optics, AO)才能维持在体深度的高空间分辨率，自适应光学可以测量和校正成像光穿过光异质样品时在波前积累的光学像差。AO与2PFM相结合，将校正的相位模式应用于物镜后瞳平面(back pupil ...

像以及明场和荧光显微镜。几十年来，解决显微图像重建和增强的逆问题一直是研究的热门话题。先前方法的一个关键组成部分是建立成像系统的前向模型。基于深度学习的数据驱动方法为解决光学显微镜中的逆问题提供了另一种途径。经过训练后，DNN可以提供一个极其快速的框架来执行图像重建和增强任务，而无需任何迭代、参数调整或物理前向模型。深度学习在光学显微镜中的应用包括明场显微镜、无透镜显微镜、荧光显微镜、超分辨率显微镜、共聚焦显微镜, 结构照明显微镜等。在显微镜中也有深度学习的新兴应用，根据我们目前对光-物质相互作用的理解，不可能建立准确的正向模型。这方面的一个例子是跨模态图像转换，其中 DNN使用来自两种不同成 ...

NIR-II荧光显微镜最大的成像深度(超过 900 μm，潜在的白质可能成为进一步可视化的障碍，图像细节开始变得稀疏)。(5) 离峰NIR-II 荧光成像(即使用发射尾端而不是峰值区域)最适合使用1400 nm长通 (NIR-IIx + NIR-IIb) 波段。利用IDSe-IC2F，其结构及合成示意见图8a,b。它的吸收谱见图8c，发射谱见图8d。在这里选用长波通荧光成像，IDSe-IC2F的长波通发射荧光光谱(900-1700nm,1000-1700nm,1100-1700nm,1200-1700nm,1300-1700nm,1400-1700nm,1500-1700nm)积分强度见图8e ...

肌图像由光片荧光显微镜获得。视频显示了红细胞如何流过跳动的心肌。比例尺，50 μm。参考文献：Wang, Z., Zhu, L., Zhang, H. et al. Real-time volumetric reconstruction of biological dynamics with light-field microscopy and deep learning. Nat Methods 18, 551–556 (2021).DOI：https://doi.org/10.1038/s41592-021-01058-x关于昊量光电：上海昊量光电设备有限公司是国内知名光电产品专业代理商， ...

不同于传统的荧光显微镜，其中激发波长短于发射波长，因为两个激发光子的波长长于所得发射光的波长。双光子激发显微通常使用近红外（1064nm）激发光，可以激发荧光染料。使用近红外的好处是可最大限度地减少组织中的散射。由于多光子吸收，同时能够减小背景噪声。这两种效果都会导致这些显微镜的穿透深度增加。基于荧光指示剂的钙成像提供了一种监测动作电位的光学方法，并被系统的用于补充微电极记录，测量体内的神经元活动。这种方法为重建小型模式生物体整个大脑中的神经元群的活动开辟了道路。钙成像技术结合双光子显微镜使得在体内测量深层神经元群体的活动成为可能。随着荧光显微镜技术的迅速发展，纯相位液晶空间光调制器在体钙成像 ...

制出超分辨率荧光显微镜”，从此人们对点扩散函数 (PSF) 工程的认识有了显着提高。Moerner 展示了 PSF 工程与 Meadowlark Optics SLM 的使用案例，用于荧光发射器的超分辨率成像和 3D 定位。 PSF工程已被证明使显微镜能够使用多种成像模式对样本进行成像，同时以非机械方式在模式之间变化。这允许对具有弱折射率的结构进行成像，以及对相位结构进行定量测量。 已证明的成像方式包括：螺旋相位成像、暗场成像、相位对比成像、微分干涉对比成像和扩展景深成像。美国Meadowlark Optics 公司专注于模拟寻址纯相位空间光调制器的设 计、开发和制造，有40多年的历史，该公司 ...

法，如双光子荧光显微镜，宽视场照明不是一个实用的选择，因为现有的超快脉冲激光源不能提供足够的功率来同时激发整个视场。虽然超快激光不能照亮整个领域，但它们的能量足以同时照亮许多感兴趣的点。困难在于有效地将光线重新分配到只需要关注的区域。纯相位型SLM非常适合这项任务，它们可以动态地调整可用于成像和光刺激的活动波束的数量和位置。纯相位SLM通常使用向列相液晶矩阵，类似于多媒体投影仪中使用的矩阵。然而，与通过遮蔽特定像素来生成图像相比，纯相位SLM利用了光的波动特性，本质上就像计算机控制的衍射光栅，其中每个像素引入不同的相位延迟，而不是调制通过的光的强度。这反过来又导致了远场中像的产生，其方式与经典 ...